期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
一种肺炎链球菌重组蛋白PsaA-PspA23原核表达载体的构建及表达
甘忠桥；孟祥玉；李博；陈晓瑞；张悦；袁剑文；梁丹虹；吴永革；谷铁军
关键词：组氨酸标签, 肺炎链球菌表面蛋白A, 同源区序列, 重叠延伸PCR
摘要：目的 优化肺炎疫苗重组蛋白基因PsaA-PspA23的同源区序列,阻止该基因的组氨酸标签(His-tag)融合表达,对突变后的目的基因进行表达及鉴定.方法 以肺炎疫苗重组蛋白基因PsaA-PspA23为模板,设计2对具有重叠区的特异性引物,并分别对该重组基因进行扩增,得到PsaA-PspA2和PspA3的CDR区(亚类决定区)基因片段.利用重叠延伸PCR(Overlap PCR)技术,将PsaA-PspA2基因片段和PspA3的CDR区基因片段连接,得到同源区优化后的基因片段.利用PCR技术扩增同源区优化后的基因片段,使该基因3'末端引入终止密码子,阻止PsaA-PspA23基因表达载体上His-tag的融合表达.将得到的片段同源区优化且无His-tag融合表达的目的基因连接至pET20b载体后,转入大肠埃希菌(E.coli中进行表达,表达产物进行Western blot分析.结果 重组表达质粒pET20b-PsaA-PspA23经双酶切和测序鉴定,证明构建正确;转化E coli中,37℃,IPTG终浓度1 mmol/L诱导5h,获得可溶性表达的重组蛋白,且无His-tag.结论 PsaA-PspA23蛋白基因同源区优化及His-tag成功去除,并在原核表达系统E.coli中可溶性表达,可为PsaA-PspA23蛋白疫苗的进一步研究奠定基础.
友情链接