期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
重组人胃蛋白酶原Ⅰ在汉逊酵母中的分泌表达、纯化及其应用
陈丹；李璐；班靖洋；郭玉争；王维龙；刘娟；李鼎锋；刘勇
关键词：胃蛋白酶原Ⅰ, 汉逊酵母表达系统, 分泌表达, 纯化
摘要：目的 实现人胃蛋白酶原Ⅰ (pepsiongen Ⅰ,PGⅠ)在汉逊酵母表达系统中的高效分泌表达,并将纯化的重组PG Ⅰ蛋白制备成体外诊断试剂用校准品.方法 根据汉逊酵母遗传密码子偏爱性优化设计并合成PG Ⅰ基因,克隆至表达载体pRMHP2.1中,电转化汉逊酵母宿主菌26012,进行多次传代及稳定,筛选高水平分泌表达PG Ⅰ的菌株,并对该菌株的目的基因整合位置及整合拷贝数进行检测.应用200 L发酵罐大规模制备发酵培养液,通过Ni柱亲和层析方法纯化获得重组PG Ⅰ蛋白,经胶乳增强免疫比浊试剂盒进行PG Ⅰ蛋白的定值,应用类血清基质液制备100及50 μg/L浓度的PG Ⅰ校准品后检测稳定性.结果 重组表达质粒pRMHP2.1-PG Ⅰ经双酶切及测序鉴定证明构建正确.筛选获得的重组汉逊酵母菌株分泌表达的PG Ⅰ蛋白相对分子质量约45 000,表达量达100 mg/L以上,其外源基因整合于宿主rDNA位置,整合拷贝数不低于20个.纯化后的重组PGⅠ蛋白纯度为94.5％,配制后的PG Ⅰ校准品经4℃实时保存稳定性、37℃加速破坏性及4 ℃开盖保存稳定性试验,校准品定值的平均下降幅度均不超过10％.结论 应用汉逊酵母表达系统可高效分泌PG Ⅰ蛋白,该蛋白具有良好的稳定性,可用作体外诊断试剂的PG Ⅰ校准品.
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