期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
西尼罗病毒抗体间接ELISA检测方法的建立、验证及其应用
曹增国；王化磊；李岭；金宏丽；王丽娜；冯娜；郑学星；赵国星；李倩
关键词：西尼罗病毒, 抗体, 间接ELISA法, E蛋白第三结构域
摘要：目的 建立及验证西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体间接ELISA检测方法,并用于评价疫苗的免疫效果.方法 以纯化后的WNV E蛋白第三结构域(EDⅢ)蛋白作为包被抗原,建立WNV抗体间接ELISA检测方法,对抗原包被浓度(2.5、5、10、20、40、80 μg/ml)、血清稀释度(1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320)、抗原封闭时间(0.5、1、1.5、2h)、血清孵育时间(0.5、1、1.5、2h)、HRP标记的山羊抗马IgG稀释倍数(1∶5 000、1∶10 000、1∶20 000、1∶40 000、1∶80 000稀释)及其孵育时间(0.5、1、1.5、2h)进行优化,并验证该方法的特异性、敏感性及精密性.采用建立的方法检测WNV阴性马血清和病毒样颗粒(WNV-VLPs)疫苗免疫的马血清,与ALPHA公司试剂盒的检测结果进行比较.结果 间接ELISA法佳检测条件为:抗原包被浓度为20 μg/ml,4℃包被过夜;Blocking ACE封闭液于37 ℃封闭1.5h;加入血清(1∶80稀释),37℃孵育1.5h;加入HRP标记的山羊抗马IgG(1∶20 000稀释),37℃孵育1h.该方法可特异性检测WNV阳性血清中的WNVE-IgG抗体;阳性血清稀释至1∶2 560时,检测结果仍为阳性;批内和批间的变异系数(CV)均小于7％.25份WNV阴性马血清检测结果均为WNVE-IgG抗体阴性,经WNV-VLPs疫苗免疫的马血清中的WNVE-IgG抗体效价水平随免疫次数的增加呈递增趋势,间接ELISA法与ALPHA公司试剂盒的检测结果完全一致.结论 成功建立了WNV抗体间接ELISA检测方法,可用于疫苗免疫效果的评价,为开展WNV流行病学调查、诊断及新型疫苗的研发奠定了基础.
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