期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
人葡萄糖调节蛋白78 shRNA真核表达质粒的构建及其稳定转染A549细胞系的建立
陈昌明；孙玲玲；林丽珠
关键词：人葡萄糖调节蛋白78, RNA干扰, 真核表达, 基因重组, A549细胞
摘要：目的 构建人葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP-78)shRNA真核表达质粒,并建立其稳定转染A549细胞系.方法 根据GenBank中登录的人GRP78基因序列(3309)设计3对互补寡聚单链DNA干扰序列(GRP78-miR-1 、GRP78-miR-2 、GRP78-miR-3)及1对阴性对照,分别插入至载体pcDNA6.2TM-GW/EmGFP,构建shRNA真核表达质粒.在Lipofectamine 3000介导下将各shRNA真核表达质粒分别转染A549细胞,并经Blasticidin S HCl加压筛选稳定的转染细胞系.实时荧光定量PCR和Western blot法检测A549细胞中GRP78基因mRNA转录和蛋白表达水平.结果 各shRNA真核表达质粒经测序鉴定证明均构建正确.稳定转染shRNA真核表达质粒的A549细胞,在荧光显微镜下可见均一表达绿色荧光.与空白对照组比较,A549细胞中GRP78基因mRNA转录和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),阴性对照组无统计学意义(P＞0.05).结论 成功构建了人GRP78的shRNA真核表达质粒,并建立了其稳定转染的A549细胞模型,为进一步研究GRP78在肺癌细胞的侵袭和转移中的作用机制奠定了基础.
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