期刊简介

  《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志,国家卫生部主管,国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章,并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务,以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。

  

首页>中国生物制品学杂志
  • 杂志名称:中国生物制品学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
  • 国际刊号:1004-5503
  • 国内刊号:22-1197/Q
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:美国《化学文摘》(CA) 美国《生物学文摘》(BA) 俄罗斯《文摘杂志》(AJ) 荷兰《医学文摘》(EM)收录期刊收录:万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
中国生物制品学杂志2015年第03期

多拷贝GnRH类似物的原核表达及其纯化

杨阳;付加芳;徐晓斌;王世立

关键词:促性腺激素释放激素, 生物活性小肽, 多拷贝串联表达
摘要:目的 原核表达促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)类似物,并进行纯化.方法 人工合成8拷贝GnRH类似物基因,并利用同尾酶技术构建16拷贝的GnRH类似物基因,将8和16拷贝串联的GnRH类似物基因分别克隆至pGEX-2t原核表达载体上,构建GnRH类似物基因多拷贝串联表达的重组质粒,并转化大肠埃希菌BL21,利用优化后的IPTG诱导表达条件表达的重组GnRH类似物蛋白经Glutathione Sepharose 4B柱纯化并酶解后,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 质粒pGEX-2t-8GnRH analogue和pGEX-2t-16GnRH analogue经双酶切及测序证明构建正确.当IPTG终浓度为0.2 mmol/L,37℃诱导2h时,破菌后上清中目的蛋白表达量高.表达的重组蛋白相对分子质量约37 000,可与兔抗GnRH单克隆抗体特异性结合,纯化后的重组蛋白相对分子质量约1 400,蛋白浓度约260 μg/ml.结论 已成功构建GnRH类似物多拷贝基因重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达,为多拷贝法生产生物活性小肽GnRH类似物奠定了基础.