期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
家蚕膜镁转运蛋白的表达及其纯化
田凤鸣；王瀚；卓平清
关键词：家蚕, 膜蛋白, 镁转运蛋白, 基因表达, 纯化
摘要：目的 在原核细胞中表达并纯化家蚕膜镁转运蛋白(Bombyx mori membrane magnesium transporter,BmMMgT).方法 利用PCR法从家蚕蚕蛹cDNA文库中扩增BmMMgT基因,对其进行生物信息学分析后,将该基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组克隆质粒pET-32a-BmMMgT,将该质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析柱和阴离子交换柱纯化后,进行SDS-PAGE鉴定.用无血清培养基(Mg2+饥饿)、镁离子终浓度分别为1、2、4、8 mmol/L的培养基培养BmN细胞,设正常培养基培养的BmN细胞作为对照,提取各组细胞总RNA,逆转录合成cDNA第1条链,以其为模板,荧光定量PCR检测体外Mg2+对BmMMgT基因mRNA转录水平的影响.结果 在cDNA文库中获得1个BmMMgT基因,该蛋白是一个单次跨膜蛋白,等电点为6.7,相对分子质量约13 000.质粒pET-32a-Bm-MMgT经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量为31 000,主要以可溶性形式存在,表达量约占菌体总蛋白的60％,纯度约95％.与对照组细胞相比,处在镁饥饿状态下及不同浓度MgCl2处理的细胞,BmMMgT基因mRNA转录水平差异均有统计学意义(P＜0.05),且当Mg2+终浓度为4 mmol/L时,转录水平达到高.结论 成功在原核细胞中表达并纯化了BmMMgT,并对其功能进行了初步探讨,为其后续的深入研究奠定了基础.
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