期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志,国家卫生部主管,国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章,并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务,以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志

- 杂志名称:中国生物制品学杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部
- 主办单位:中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号:1004-5503
- 国内刊号:22-1197/Q
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:美国《化学文摘》(CA) 美国《生物学文摘》(BA) 俄罗斯《文摘杂志》(AJ) 荷兰《医学文摘》(EM)收录期刊收录:万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
重组人VEGF121KDR/rGEL融合毒素在大肠埃希菌中的表达、纯化及其活性
孙红琰;刘爱军;申云飞;李月;刘敏霞;武福军;申严杰;周满祥
关键词:血管内皮生长因子, 融合毒素, 生物活性, 肿瘤, 靶向治疗
摘要:目的 在大肠埃希菌中表达具有血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)/KDR(含激酶插入域的受体)特异性的重组人VEGF121KDR/白树籽核糖体失活蛋白(rGEL)融合毒素,纯化后检测其生物活性.方法 将rhVEGF121KDR/rGEL融合毒素全基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-VEGF121KDR/rGEL,转化大肠埃希菌Origami(DE3),IPTG诱导表达;表达的目的蛋白经SP-Sepharose FF、Ni-Sepharose FF纯化后,用凝血酶酶切,酶切产物经Q-Sepharose FF纯化;以细胞表面分别高表达VEGFR1/FLT1和VEGFR2/KDR的猪动脉血管内皮细胞PAE/FLT1和PAE/KDR为靶细胞,检测纯化的rhVEGF121KDR/rGEL融合毒素的细胞毒性.结果 重组原核表达质粒pET-32a(+)-VEGF121KDR/rGEL经双酶切和测序证实构建正确;表达的目的蛋白为标签蛋白硫氧化还原蛋白(thioredoxin,Trx)与rhVEGF121KDR/rGEL的融合蛋白,其相对分了质量约为62 000,蛋白呈可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的20%,去除标签蛋白的纯化rhVEGF121KDR/rGEL融合毒素相对分子质量约为43 000,纯度大于98%;VEGFR2阳性细胞PAE/KDR和VEGFR1阳性细胞PAE/FLT的半数抑制浓度(IC50)分别为0.32和278 nmol/L,后者为前者的800多倍.结论 已成功在大肠埃希菌中表达了rhVEGF121KDR/rGEL融合毒素,纯化的融合毒素对过度表达VEGFR2的血管内皮细胞具有很强的杀伤作用,为进一步研究其抗肿瘤作用及开发新型靶向抗癌药物奠定了基础.
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