期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
细胞株逆转录酶活性SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法的建立及验证
王晨；李永红；付志浩；张爱华；饶春明
关键词：细胞株, 逆转录酶, 活性, 实时定量PCR
摘要：目的 建立生物制品生产用细胞株逆转录酶活性SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法,并进行优化及初步验证.方法 以MS2噬菌体RNA模板及相应引物,建立一步检测逆转录酶扩增产物的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,以梯度稀释的重组莫洛尼鼠白血病病毒(Moloney murine leukemia virus,MMLV)逆转录酶活性参考品绘制标准曲线,进行逆转录酶活性的定量.对反应的引物和2×RT-PCR Mix进行优化,并对建立的方法进行线性关系、灵敏度、精密度和准确度验证.结果 1组引物(上游:5’-CATAGGTCAAACCTCGTAGGAATG-3',下游:5'-TCCTGCTC-AACTTCCTGTCGAG-3’)更适合本方法;Promega公司生产的2×RT-PCR Mix具有更高的反应效率.逆转录酶活性在5.40×108 ～ 5.40×104 pU/μl范围内定量标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.999 7;该方法判断样品阴阳性的标准cut-off值为1.31×104 pU/μl;检测CHO-1细胞株样品逆转录酶活性的试验内变异系数(CV)为0.80％,试验间CV值为l6.4％;检测5株细胞样品逆转录酶活性的平均加标回收率为122.8％.结论 建立了生物制品生产用细胞株逆转录酶活性SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法,该方法能够准确地定量检测细胞株的逆转录酶活性.
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