期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
呼吸道合胞病毒截短G蛋白的原核表达、纯化及其免疫原性
李光；井申荣；田君；曾韦锟；魏云林
关键词：呼吸道合胞病毒, G蛋白, CX3C, 免疫原性, CTL
摘要：目的 构建呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)截短G蛋白的原核表达载体,并对表达、纯化后的蛋白进行免疫原性及相关免疫指标的检测.方法 人工合成G蛋白基因的部分核酸序列,采用重叠PCR法将CX3C模序替换为RSV M蛋白上的CTL表位,构建原核表达载体GCX3C-pET22b和GCTL-pET22b,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE鉴定后,采用Ni2+亲和层析柱纯化目的蛋白.纯化产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定后,免疫昆明小鼠,实验分GCC组(100μg GCX3C)、GCTL组(100μg GCTL)、阴性对照组(100μl PBS),分别于0、1、4周经小鼠双后侧肌肉注射免疫,经尾梢静脉取血,分离血清,检测IgG水平及嗜酸性粒细胞的数量,并通过小鼠体外淋巴细胞杀伤试验鉴定RSV特异性CTL应答.结果 重组原核表达载体经双酶切及测序鉴定,证明G蛋白基因改造成功；重组蛋白的相对分子质量约14 000,表达量约占菌体总蛋白的40％,主要以可溶性形式表达；纯化的重组蛋白纯度达90％以上,可与抗RSV血清发生特异性反应；小鼠血清中的特异性IgG水平随免疫次数的增加而升高(P＜0.01),GCX3C蛋白和GCTL蛋白的几何平均滴度分别为1 584.89和1 995.26; GCX3C组较GCTL组小鼠血清中嗜酸性粒细胞数量明显增加(P＜0.01)；GCTL蛋白免疫小鼠后可产生RSV特异性的CTL应答效应.结论 已成功原核表达了GCX3C蛋白和GCTL蛋白,两种蛋白均有较好的免疫原性,GCTL蛋白可消除由CX3C模序引起的嗜酸性粒细胞增多,并增强了CTL效应,G蛋白基因的改造达到了预期效果.
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