期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
HIV-1 HXB2株tat(B41-101N)融合基因原核表达质粒的构建及表达
廖文婷；陈璐；曹洁；陈秋莉；王锦红；唐萍；庞强；黄德胜；潘卫
关键词：HIV-1, Tat 蛋白, 融合蛋白, 原核表达, 重叠延伸 PCR
摘要：目的 构建HIV-1 HXB2株tat(B41-101N)融合基因原核表达质粒,表达并纯化Tat(B41-101N)融合蛋白,为进一步研究其免疫原性奠定基础.方法 在HIV-1 HXB2株天然Tat蛋白N-端添加Tat41-101位氨基酸(aa),采用PCR法从HIV-1HXB2株tat基因中扩增分别编码Tat41-101aa和Tat1-101aa的tat41-101和tatl-101两个基因片段,重叠延伸PCR法扩增其融合基因tat(B41-101N),并构建其原核表达质粒pET32a-tat(B41-101N),经双酶切及测序验证后,转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导表达.融合蛋白经Ni~(2+)-NTA柱亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE、Western blot及ELISA鉴定.结果 重叠延伸PCR扩增出约500 bp的tat(B41-101N)融合基因,酶切及测序结果表明重组表达质粒pET32a-tat(B41-101N)构建正确,SDS-PAGE分析显示,表达的Tat(B41-101N)融合蛋白相对分子质量约为36 000,约占菌体总蛋白的7%.纯化后纯度约为60%;WeStern blot 和ELISA分析显示,Tat(B41-101N)融合蛋白与小鼠抗Tat单抗及抗-HIV阳性血清(抗Tat抗体阳性)均呈特异性阳性反应.结论 已成功构建了HIV-1HXB2株tat(B41-101N)融合基因原核表达质粒,并表达了其融合蛋白,该蛋白较好地保留了天然Tat蛋白的免疫反应性,为Tat新型疫苗的研究奠定了基础.
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