期刊简介

  《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志,国家卫生部主管,国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章,并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务,以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。

  

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  • 杂志名称:中国生物制品学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
  • 国际刊号:1004-5503
  • 国内刊号:22-1197/Q
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:美国《化学文摘》(CA) 美国《生物学文摘》(BA) 俄罗斯《文摘杂志》(AJ) 荷兰《医学文摘》(EM)收录期刊收录:万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
中国生物制品学杂志2006年第04期

人乳头瘤病毒16型L1/E7嵌合基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

宋衍燕;李秀玲;何薇薇;张中洋;许丽锋

关键词:人乳头瘤病毒, 毕赤酵母, 基因表达
摘要:目的克隆人乳头状瘤病毒16型(HPV16)L1/E7嵌合蛋白基因,并在毕赤酵母中表达.方法PCR扩增HPV16 L1/E7基因,并克隆至毕赤酵母表达载体pPIC-3.5K和pPIC-9K中,构建含HPV16 L1/E7基因的pPIC3.5K-HPV16 L1/E7和pPIC9K-HPV16 L1/E7重组表达载体,经测序证实插入的外源基因读码框正确后,分别转入GS115和KM71菌株中,筛选阳性转化菌株,经PCR鉴定,甲醇诱导表达HPV16 L1/E7嵌合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,电镜观察,并经离心法纯化VLPs.结果HPV16 L1/E7基因已成功插入pPIC-3.5K和pPIC-9K载体中,共获得6株KM71 HPV16 L1/E7-pPIC3.5K、5株GS115 HPV16 L1/E7-pPIC3.5K、1株KM71 HPV16 L1/E7-pPIC9K和2株GS115 HPV16 L1/E7-pPIC9K阳性转化菌株,并可表达相对分子质量约为69 000的蛋白,与预期值一致.表达量约为0.35~1.04mg/ml.Western blot显示该蛋白可与抗-HPV16 L1蛋白和抗-HPV16 E7蛋白的单克隆抗体特异性结合.在透射电镜下可观察到VLPs的形成,其形态与HPV16天然病毒颗粒相似.经纯化的目的蛋白纯度接近100%.结论已成功构建了pPIC3.5K-HPV16 L1/E7和pPIC9K-HPV16 L1/E7重组表达载体,阳性转化菌株可表达结构与野生型HPV16一致的VLPs.