期刊简介
《中国生物制品学杂志》为中华预防医学会系列杂志，国家卫生部主管，国内外公开发行。本刊为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域，如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及各种基金赞助课题的文章，并适当照顾边远地区和基层单位。本刊可承接国内外与生物制品及生物技术产品有关的设备、试剂广告业务，以刊物所具有的最广泛和最有效的传播能力做好客户的产品宣传。
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首页>中国生物制品学杂志
- 杂志名称：中国生物制品学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 国际刊号：1004-5503
- 国内刊号：22-1197/Q
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》（CA） 美国《生物学文摘》（BA） 俄罗斯《文摘杂志》（AJ） 荷兰《医学文摘》（EM）收录期刊收录：万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美)
HCV聚合酶在大肠杆菌中表达产物的纯化及结构研究
杨振；蒋建东；祁自柏；陈鸿珊；张华远；李河民
关键词：丙型肝炎病毒, 聚合酶, 融合蛋白, 原核表达, 结构
摘要：目的构建HCV聚合酶基因重组原核表达质粒,研究高效表达聚合酶蛋白的适条件、表达产物的纯化方法以及佳变性和复性条件,同时分析其二级结构,为建立细胞外HCV聚合酶复制模型及筛选药物创造条件.方法采用高保真PfuDNA聚合酶进行反转录及套式PCR扩增,从我国HCV RNA阳性病人血清中扩增出HCV NS5b RNA聚合酶全长基因序列,构建原核表达载体.在多个载体中选取pET-30a作为表达载体,选择诱导表达条件.利用Ni2+金属离子螯和亲和层析将其纯化.同时对该酶蛋白的变性和复性条件进行研究,对其相关的分子生物学参数和二级结构进行分析.结果测序及读码框架分析结果表明,按照上述技术路线得到了相关HCVNS5bRNA聚合酶全基因序列.在佳表达条件下,诱导表达融合蛋白(相对分子质量65000),其高表达量为18.9%,纯度大于92.83%,Westem blot法检测,能与HCV NS5b单抗反应,证明其为NS5b蛋白.对其二级结构的分析表明,已获得了活性基团完整的HCV聚合酶.结论 HCV聚合酶的高效表达和纯化,为建立细胞外HCV聚合酶复制模型及筛选药物奠定基础.
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